博九彩票

产品列表PRODUCTS LIST

首页 > 新闻中心 > 维生素测定培养基的试样处理的顺序是怎么样的
维生素测定培养基的试样处理的顺序是怎么样的
点击次数:77 发布时间:2018-12-14
   维生素测定培养基的试样处理的顺序是怎么样的
  
  维生素B12测定用培养基,不含维生素B12,但包含所有其他维生素和必要养分,用于莱士曼乳酸杆菌(ATCC7830)的生长。莱士曼乳酸杆菌(ATCC7830)作为测定用菌,zui早由Capp等人描述(1)并被美国药典和美国分析化学家协会(AOAC)所推荐(2,3)。
  
  用已知稀释度的维生素B12标准品,可以制备标准曲线(2,3)。
  
  测试菌液的制备是将将活化后的菌株接种到乳酸杆菌肉汤培养基中,推荐在37°C孵育24小时,再离心、清洗、重悬于10ml生理盐水中,再通过浊度分析或酸度分析,确定生长反应。
  
  用维生素B12的浓度及对应的吸光度制作标准曲线。用标准曲线可确定待测样本中的维生素B12的浓度。
  
  维生素测定培养基的操作方法
  
  (1)试样处理
  
  ①皂化:准确称取1~10g试样(含维生素A约3μg,维生素E各异构体约为40μg)于皂化瓶中,加30mL无水乙醇,进行搅拌,直到颗粒物分散均匀为止。加入5muO%抗坏血酸、苯并[P]芘标准液2.OOmL,混匀,加10mL氢氧化钾溶液(1+1),混匀。于沸水浴回流30min,使皂化完全。皂化后立即放入冰水中冷却。
  
  ②提取:将皂化后的试样移入分液漏斗中,用50mL水分2~3次洗皂化瓶,洗液并入分液漏斗中,用约100mL乙mi分两次洗皂化瓶及其残渣,乙mi液并入分液漏斗中。如有残渣,可将此液通过有脱脂棉的漏斗滤入分液漏斗中。轻轻摇动分液漏斗2min,静置分层,弃去水层。
  
  ③洗涤:用约50mL水洗分液漏斗中的乙mi层,用pH试纸检验直至水层不显碱性(最初水洗轻摇,逐次振摇强度可增加)。
  
  ④浓缩:将乙mi提取液经过无水硫酸钠(约5g)滤入与旋转蒸发器配套的250~300mL球形蒸发瓶内,用约100mL乙mi冲洗分液漏斗及无水硫酸钠3次,并入蒸发瓶内,并将其接至旋转蒸发器上,于55℃水浴中减压并回收乙mi,待瓶中剩下2mL乙mi时,取下蒸发瓶,立即用氮气吹掉乙mi,立即加入2.OOmL乙醇,充分混合,溶解提取物。
  
  将乙醇液移入一小塑料离心管中离心5min(5000r/min)。上清液供色谱分析。如果试样中维生素含量过少,可用氮气将乙醇液吹于后,再用乙醇重新定容,并记下体积比。
  
  
在线客服
用心服务 成就你我
友情链接:平安彩票  盛兴彩票  平安彩票官网  平安彩票  盛世彩票  幸运彩票  平安彩票官网  

免责声明: 本站资料及图片来源互联网文章,本网不承担任何由内容信息所引起的争议和法律责任。所有作品版权归原创作者所有,与本站立场无关,如用户分享不慎侵犯了您的权益,请联系我们告知,我们将做删除处理!