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肠杆菌科的检测和鉴定
点击次数:191 发布时间:2019-06-26

在食品和饲料的初级生产阶段,以及食品车间环境中,常需检查肠杆菌科细菌的存在和计数。在《ISO 21528-1:2017 食品和动物饲料的微生物学 肠杆菌科检测和计数的水平法》中,可以看到该标准关于肠杆菌科的检测方法的推荐。

 

ISO 21528-1:2017取代的是ISO 21528-1:2004,主要是做的方法上的调整,如原先是用缓冲蛋白胨水(BPW)预增菌,再用EE肉汤增菌,现在则改用

BPW直接增菌;验证试验是用葡萄糖OF培养基,而非葡萄糖琼脂。该ISO适合两种情况,一是微生物需要通过增菌来复苏,二是预期微生物数量小于100/ml(g)样品。

 

其大致流程如下:首先将样品在BPW孵育37℃,18h,再在VRBG培养基上接种,37℃孵育24h±2h,观察典型菌落(粉红色菌落)。再选择可疑菌落,接种至非选择性培养基如营养琼脂平板上进行纯培养,37℃孵育24h±2h。然后挑取一个菌落进行氧化酶试验。如为阴性。则对该菌落再进行葡萄糖发酵试验。葡萄糖发酵试验采用的是葡萄糖OF培养基,37℃孵育24h±2h后,如果试管液体变为黄色,则为阳性反应。

 

 

图片1.png 

 

 

这是即可汇报检测结果了。如果不想做上述2种验证试验,而且需要进一步对肠杆菌科鉴定到种,则可采用HiMedia公司生产的生化鉴定卡。HiMedia公司至少有2种肠杆菌科生化鉴定卡,一种货号是KB003品名为Hi25™ Enterobacteriaceae Identification Kit。另一种货号是KB016,品名为Hi24™ Enterobacteriaceae Identification Kit。 KB003包含25项检查(含13种传统生化试验和含葡萄糖在内的11种糖发酵试验和1个氧化酶试剂纸片),可鉴定68种肠杆菌。KB016包含24种生化类型,可鉴定65种肠杆菌。KB016和KB003相比,有15种生化反应二者重合:

 

ONPG试验、赖氨酸脱羧试验、鸟氨酸脱羧试验、尿素酶试验、苯丙氨酸脱氨试验、伏普试验、甲基红试验、吲哚试验、七叶苷水解试验、纤维二糖发酵试验、蜜二糖发酵试验、蔗糖发酵试验、海藻糖发酵试验、葡萄糖发酵试验、乳糖发酵试验、

 

KB003独有的生化反应包括:

硝酸盐还原试验、H2S产生试验、柠檬酸利用试验、丙二酸利用试验、阿拉伯糖发酵试验、木糖发酵试验、核糖醇发酵试验、鼠李糖发酵试验、棉子糖发酵试验、氧化酶纸片试验。

 

KB016独有的生化类型包括:

吡咯烷酮酶试验、β-葡萄糖醛酸酶试验、α-半乳糖苷酶试验、β-木糖酶试验、山梨醇发酵试验、水杨苷发酵试验、甘露糖发酵试验、麦芽糖发酵试验、

 

在实际肠杆菌科成员的鉴定中,客户可选择使用。

 

HiMedia公司是国际知名微生物产品生产商,一直致力于微生物培养和鉴别鉴定产品的研发和生产,具有WHO GMP认证、ISO9001:2008,ISO13485:2003认证,CE认证和FDA注册登记。其产品行销全球140多个国家。

 

缔一生物作为HiMedia公司在中国的代理商,在微生物培养和检测领域,一如既往地为您带来优质的服务。

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