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血清or无血清培养基的主要优缺点
点击次数:218 发布时间:2019-03-15

细胞培养基是细胞培养好坏的重要决定因素。近二十年来,无血清培养基越来越受到重视。它不含动物血清或其他生物提取液,仍可使细胞在体外较长时间生长、增殖或维持。它继天然培养基、合成培养基之后发展而来,尤其应用于哺乳动物细胞的大规模工业培养。同时,它也是研究细胞生长、增殖、分化及基因表达调控的有力工具。

 

常规培养基在基础培养基中添加了一定量的血清或组织提取物,它存在以下优缺点:

优点:

(1)血清作为天然培养基,含有丰富全面的细胞生长必需的营养,具有极为重要的功能。

(2)提供维持细胞指数生长的激素、生长因子以及一些低分子营养物。

(3)提供的结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他激素等,调节其活性。

(4)提供的结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到解毒作用。

(5)是细胞贴壁、铺展所需的因子来源。

缺点:

(1)血清有时含有细胞生长抑制因子和毒性因子,存在潜在毒性。

(2)血清获取成本高,价格较贵。

(3)血清由于成分不太明确,,给细胞培养的标准化带来困难,同时也给细胞表达的目的产物纯化带来困难。

 

由于常规培养基存在的上述问题,无血清细胞培养基的开发和应用渐成趋势。无血清培养可在很大程度上可以避免血清所带来的不利,但它同时也有一些不足。其优缺点具体如下:

 

优点:

(1) 其组成明确,可避免血清不同批次带来的质量变动,提高可重复性。

(2)避免血清对细胞的毒性作用和血清源性污染风险。

(3)避免血清不明组分对实验研究的影响。

(4)有利于体外培养细胞的分化。

(5)可提高细胞产物的表达水平并易于纯化。

 

缺点:

(1)细胞在无血清培养基中易受某些机械和化学因素的影响,培养基的保存和应用不如传统的合成培养基方便。

(2)成本较高。

(3)针对性很强,一种无血清培养基仅适合某一类细胞的培养。

(4)无血清培养基由于营养不如血清全面,可能存在潜在的营养不足。

 

缔一生物为您介绍一款可用于Vero细胞无血清培养[1]的SFRE199培养基。它可作为基础培养基,再添加其他成分后可用于Vero细胞的无血清培养。它对传统培养基M199进行了改良,开始是用于狒狒原代肾细胞的培养,由国际知名生物公司HiMedia公司生产。

 

SFRE-199系列将M199配方中的部分成分进行了调整:精氨酸增至150mg/L,半胱氨酸增至4mg/L,胱氨酸增至40mg/L,谷氨酰胺增至300mg/L,谷氨酸增至75mg/L,甘氨酸增至100mg/l,组氨酸增至40mg/L,酪氨酸增至80mg/L,以获得较好的细胞生长而未表现出毒性。

 

SFRE199-1和SFRE199-2二者均含有L-谷氨酰胺、半乳糖和葡萄糖。SFRE M199-2(货号AT090)含有Earle's盐,而SFRE M199-1含有Hank盐。两种盐的主要差别在于碳酸氢钠的水平, 碳酸氢钠在Eagles (2.2g/L)比在Hanks (0.35g/L) 中高。选用哪种取决于培养环境中的CO2浓度。

 

 

参考文献

[1] Jack Litwin.The growth of Vero cells in suspension as cell-aggregates in serum-free . State Bacteriology Laboratory, 105 21 Stockholm, Sweden.

 

缔一生物作为HiMedia公司在中国的代理商,在细胞培养、微生物培养和检测领域,一如既往地为您带来优质的服务。

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