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Vero细胞无血清培养基在流感疫苗中的应用
点击次数:177 发布时间:2019-03-04

流行性感冒(Influenza)简称流感,是由流感病毒(Influenza Virus)引起的急性呼吸道疾病,流感病毒具有高度的传染性和较强的变异性,每年在全球各个国家呈季节性流行和地区性爆发,甚至世界范围内流行。

面对流感侵袭,人们主要通过勤洗手、带口罩或开展公众教育等措施进行预防,但这些措施并不十分有效。为有避免流感的侵袭,20世纪40年代,人们通过鸡胚扩增得到的流感疫苗株,用于人类的流感预防效果显著。目前,正在使用或正在研发的针对流感的疫苗包括全病毒疫苗、裂解疫苗、亚单位疫苗及冷适应减毒活疫苗仍是使用鸡胚为培养基质生产的,然而大流感发生时不断増长的疫苗和疫情防控需求使鸡胚生产平台中鸡胚供应不足、卵清蛋白过敏及产量有限等诸多缺陷越来越明显。

迫切需要找到一种能快速生产安全有效的流感疫苗的介质,世界卫生组织(WHO)推荐利用哺乳动物细施培养技术替代鸡胚培养技术生产流感疫苗。利用细胞培养生产流感疫苗具有显著的优点:①细胞培养系统操作简单,可实现大规模培养;②细胞培养系统中繁殖的病毒与原流感病毒分离株的匹配度更高;③鸡胚生产的流感疫苗可能引发人体过敏反应,而通过细胞培养制备的疫苗可克服此缺点。

目前可用于流感疫苗生产的细胞系主要有狗肾肿瘤细胞系(MDCK)、非洲绿猴肾细胞系(Vero)、人视网膜细胞系(PER.C6)等。其中Vero细胞系是世界卫生组织(WHO)和我国生物制品规程推荐的人用疫苗生产细胞系,已成功应用于包括流感疫苗在内的多种疫苗的生产,其安全性已得到充分认证。

在疫苗生产过程中,为了获得高滴度、高质量的病毒液,需要高密度的细胞提供病毒复制的基质,为实现细胞的高密度培养,在体外培养细胞时会添加一定量的血清,血清可提供细胞生长所需的必需营养物质,如贴壁生长因子、激素、微量元素、载体蛋白等。

使用血清也会有很多的不足:①血清容易引起细菌、真菌、病毒及支原体的污染,会增加疫苗生产的安全性隐患;②血清的质量在批次间存在很大的差异,影响疫苗生产工艺的稳定性和疫苗质量控制;③血清成分复杂,含有多种蛋白质、激素、生长因子等,増加疫苗等产品连续纯化过程的难度;④血清价格昂贵,在产品规模化生产时会増加放大成本;⑤血清中含有能促进细胞生长的物质,但也含有一些对细胞有毒性作用和抑制作用的物质,影响细胞的生长,血清使用造成的细胞培养过程和疫苗生产的安全性问题及生产成本増加的问题,成为动物细胞无血清培养技术研究和应用的发展动因,因此,基于细胞和产品特性的无血清培养基研制己成为细胞工程领域的重要课题。

例如:HiMedia公司生产的基础培养基SFRE系列,是基础培养基M199的改良款,该系列分为SFRE199-1和SFRE199-2,可用于培养Vero细胞。与M199相比主要区别是提高了葡萄糖和氨基酸的浓度,降低了硝酸铁、黄嘌呤和碳酸氢钠的浓度。另外加入硫酸锌、丙酮酸钠和鱼精蛋白锌胰岛素。

 

SFRE 199-1有Hank's盐;SFRE 199-2含有Earle's盐,两款均不含胰岛素,需要使用前自行添加。可无血清培养,与加胎牛血清的常规培养基比较,细胞生长速率、产量和蛋白容量均相同,均在移植后第6天单层细胞达到充分融合。

 

缔一生物作为HiMedia公司在中国的代理商,在细胞培养、微生物培养和检测领域,一如既往地为您带来优质的服务。

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