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浅谈血清培养基的劣势及潜在风险
点击次数:136 发布时间:2019-03-04

疫苗的作用主要是预防传染性疾病、新型流行病及暴发流行,尤其如乙型肝炎呈世界流行,是全球性的健康问题。健康人群是主要的接种对象,因此,保证疫苗的质量和安全性是重要的问题,其关键在于做好生产方式和过程的把关,保证生产用原材料的安全和质量。在疫苗生产过程中,为了获得高滴度高质量的病毒培养液,需要高密度的培养细胞基质。

 

 

细胞高密度培养主要从培养基着手,通过补充某些营养添加因子优化培养基促进细胞生长。常用的添加因子是牛血清,它能够提供给Vero细胞在体外贴附培养的必需物质,如贴壁因子、生长因子、激素、营养物质,在体外模拟稳定的环境,促进细胞高密度生长。但是血清是成分复杂的混合物,其所含的组分不完全明确,因此,细胞培养技术中血清的使用存在诸多的缺点和风险。

 

第一,使用血清较大的风险是向疫苗产品中引入血源性病原生物污染的潜能,从而影响疫苗的生产工艺和安全问题;

 

第二,牛血清对细胞具有毒性作用和抑制作用,牛血清的成分复杂,在给细胞提供营养的同时会负向影响Vero细胞在微载体表面的贴附效果。据文献报道,培养基添加的牛血清白蛋白易吸附在微载体表面,使细胞在微载体表面的贴附率明显下降;

 

第三,血清在质量上存在很大的批间差异,增加了疫苗生产工艺的不稳定性和疫苗质量控制的难度,从而影响疫苗的质量;

 

第四,血清价格昂贵,增加了生产工艺规模化放大的成本;

 

第五,血清所含的多种杂质如蛋白、激素、多肽、细胞因子等给疫苗生产的后续纯化工艺增加了困难。

 

血清的这些不利因素促使动物细胞无血清培养基取代传统的牛血清培养基已成为病毒性疫苗生产的一个重要发展趋势。

 

Vero细胞是疫苗生产的常用细胞,常用的基础培养基有M199、DMEM和F12等,缔一生物为您介绍一款适用于Vero细胞的无血清培养基,由国际上HiMedia公司生产的M199的改良款——SFRE199-1和SFRE199-2。

 

SFRE-199系列将M199标准配方中的精氨酸增加到150mg/L,半胱氨酸增至4mg/L,胱氨酸增至40mg/L,谷氨酰胺增至300mg/L,谷氨酸增至75mg/L,甘氨酸增至100mg/l,组氨酸增至40mg/L,酪氨酸增至80mg/L,以获得较好的细胞生长而未表现出毒性。

 

另外,SFRE-199系列还降低了硝酸铁、黄嘌呤和碳酸氢钠的浓度。SFRE 199-1与SFRE 199-2的不同在于,前者含有Hank's盐,而后者所含为Earle's盐。与加胎牛血清的常规培养基比较,细胞生长速率、产量和蛋白容量均相同,均在移植后第6天单层细胞达到充分融合。

 

缔一生物作为HiMedia公司在中国的代理商,在细胞培养、微生物培养和检测领域,一如既往地为您带来优质的服务。

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