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阪崎肠杆菌的检验方法介绍
点击次数:187 发布时间:2018-09-25

传统的检验方法

传统的阪崎肠杆菌分离检测方法,依赖于生化和形态学特点,国际上通常以美国 FDA 颁布的“婴儿配方奶粉中阪崎肠杆菌的分离计数”作为经典方法。2008年我国也制定了阪崎肠杆菌检验国家标准,并于2010 年、2016年进行了修订,规范了阪崎肠杆菌检测,目前依据我国食品安全国家标准食品微生物学检验GB4789.40—2016检测阪崎肠杆菌。

 

检验程序:检样 100 g(mL)+ BPW 稀释液 900mL→ 1 mL+Mlst-Vm→阪崎肠杆菌显色培养基→挑取疑似菌落→TSA→挑取黄色菌→生化鉴定→报告。

 

阪崎肠杆菌显色培养基,可选用国际上HiMedia公司生产的阪崎肠杆菌显色培养基(货号:MV1577),该培养基适用于从食物、牛奶和奶制品中分离鉴定阪崎克罗诺杆菌属(阪崎肠杆菌),采用无疯牛病风险的植物蛋白胨取代了动物蛋白胨,植物源成分,优质品质,值得信赖。若检测进出口食品依据国际标准可选用另一款崎肠杆菌显色培养基(货号:MV1641),该培养基遵循ISO /TS 22964: 2006。

 

 

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱检验法

 

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MAL-DITOF- MS)法是将被测样品以一定的比例与基质溶液相混合,利用脉冲激光照射激发基质,致使高分子生成分子离子以及分子离子的多聚体,在一时间飞行质谱仪中加速与检测,结果被测高分子按质量数的大小进行分离,经过处理形成质量图谱,通过软件分析比较,筛选并确定出特异性(指纹) 图谱,从而实现对目标微生物种或菌株的区分和鉴定。但分析成本高,器价格及日常维护费用贵。

 

分子生物学检验方法

 

目前用于乳制品中的阪崎肠杆菌的分子生物学检验方法包括普通PCR法(电泳法)、DNA环介导等恒扩增(LAMP)检验法和荧光 PCR 法等。这种方法克服了传统检验方法的操作繁琐、耗时长、不易分辨结果等缺点。也使得针对阪崎肠杆菌开展的快速检测方法迅速发展。但采用该方法也存在需要样品中测定菌浓度高、分析成本高、操作繁琐,无法鉴定是否有活菌存在等缺点。

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