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一种单增李斯特菌的分离方法
点击次数:146 发布时间:2018-09-18

涉及食品安全的一个主要因素是由致病性微生物引起的食源性疾病。在各地发生的一系列食源性疾病中,单核细胞增生性李斯特菌占着主要的地位。单核细胞增生性李斯特菌简称为单增李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM),是李斯特菌属(Listeria)中能引起人畜共患病的食源性病原菌,是食品中四大病原菌之一。1988年,WHO发表了“食源性李斯特菌病”劝告书,指导世界各国如何预防的污染和中毒,劝告各公共卫生机构加强监测的力度,同时也将其列为食源性病菌重点检测的对象之一。目前,虽然我国没有发生大规模爆发流行,但却有大量关于食品被单增李斯特菌污染的报告,这同样引起了人们的关注。

 

如何有效分离和鉴定出单增李斯特菌,成为食品安全的重要问题。我国关于食品中李斯特菌的检验根据我国食品安全国家标准GB 4798.30-2010,包括增菌、分离和鉴定 3 个环节。目前,分离环节常会采用显色培养基,使其菌落颜色不同于其它干扰菌,实现快速分离。

 

HiMedia公司(国际知名微生物培养基生产商)生产的单增李斯特菌显色培养基(HiCrome标识,货号MV1540),该培养基是根据ottaviani 和 Agosti 开发的单核细胞增生李斯特氏菌鉴别基础培养基,用于从食物和动物饲料中选择性分离鉴别单核细胞增生李斯特氏菌,在这款李斯特氏菌显色培养基在该培养基配方上略作改良,它在制备时用无疯牛病风险的植物蛋白胨取代了动物蛋白胨。

 

培养基中的HiVeg蛋白胨1号、HiVeg水解物、酵母粉和丙酮酸钠提供了细菌生长所必需的营养和氮源物质。葡萄糖是可发酵的碳水化合物。氯化钠维持渗透压平衡。磷酸盐是缓冲液成分。氯化锂和选择性添加剂(FD212和FD213)抑制伴随的菌群生长,而允许李斯特氏菌生长。李斯特氏菌水解显色底物,产生绿色菌落。从其它李斯特氏菌中鉴别出单核细胞增生李斯特氏菌,是依据其特有的磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C(PIPLC)活性。磷脂酶C水解培养基中的底物添加剂(货号FD214)导致单核细胞增生李斯特氏菌菌落周围产生不透明的晕环。由于单核细胞增生李斯特氏菌和英诺克李斯特氏菌具有相似的生化特性,传统培养基(PALCAM培养基)不能区分,使用该培养基可以有效区分开,且该培养基成分完全符合我国国家标准,HiMedia公司产品有国际认证的GMP,CE和FDA,ISO9001,ISO13485等证书,优质品质,值得信赖。

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