产品列表PRODUCTS LIST

联系信息

  • 电话:
    400-166-8600
  • 传真:
    86-区号-传真号码
首页 > 技术与支持 > 活性因子的生物测定法——威正翔禹|缔一生物
活性因子的生物测定法——威正翔禹|缔一生物
点击次数:161 发布时间:2018-05-16

在分析化学中,常常采用色谱、质谱、磁共振和一般生化以及免疫学方法对样本成分进行测定。但还存在一类特殊的测定方法,即生物测定法。生物测定法的产生由来已久,常常用于有生物活性和生理功能的因子的测定。它常常采用一种哺乳动物细胞或者一种细菌,作为可用于观察或测量的响应器或效应器(effector),来对活性因子进行检测,这也有些近似药效学实验。例如白细胞介素2,它是一种T细胞生长因子,它是用小鼠的T淋巴细胞系CTLL-2细胞的增殖来检测,ED50等于0.1ng/ml,可见该法的灵敏度相当高。

 

因此,生物测定在方法学上是一种很有特点、很有用的方法。它也不限于测定某个因子,而也可以测定生物制品,如用二倍体细胞的促生长状况来质控胎牛血清。在食品领域中,也有生物测定法,只不过是其中的一个分支,是微生物培养法,或微生物法,来检测维生素,如微生物B12、叶酸、泛酸、烟酸、生物素等。

 

维生素也是一类活性因子,具有重要的生理作用。例如,缺少叶酸会导致胎儿神经管发育障碍。而我国的婴幼儿配方乳品中,存在有的品牌叶酸等维生素不足的情况,因而达不到补充营养的效果。因此,测定食品中的维生素含量十分重要,尤其是奶制品。

 

微生物法测定维生素,原理和上面所说差不多。通过添加维生素标准品或样品中的维生素,使原先不含有这种维生素的培养基具有了这种营养,从而使鼠李糖乳杆菌、莱士曼乳杆菌、植物乳杆菌等测定菌能够不断增殖,直到这种维生素营养耗尽。而检测OD值可以确定试管中的菌量。需要注意的是,为了保证线性增长,需要在适当的范围内进行标曲和测定,必要的话对样本进行稀释。又叶酸测定菌鼠李糖乳杆菌据报道,在增殖过程中容易产生大量絮状沉淀,尤其在高浓度标准管中更为明显。因此建议将絮状物质进行充分震荡,并快速进行光密度的测定。同时注意所用初始培养基应尽量不含痕量待测的维生素,否则会造成标曲偏移和本底过高。目前该产品只有进口的质量较为可靠,如微生物培养基生产商HiMedia公司生产的叶酸干酪培养基和维生素B12测定用培养基。

 

总之,微生物法在生物测定法中灵敏度极高,而且操作步骤简单,不需要特别的技巧和设备,也不需要一系列的提纯步骤。即使有些类别样品需要提取,但步骤仍然简单,因此微生物法在生物测定法中仍然占有重要的一席之地。

联系人
在线客服
用心服务 成就你我

免责声明: 本站资料及图片来源互联网文章,本网不承担任何由内容信息所引起的争议和法律责任。所有作品版权归原创作者所有,与本站立场无关,如用户分享不慎侵犯了您的权益,请联系我们告知,我们将做删除处理!