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把支原体赶出去?你可能只差一个Zell Shield®的距离!
点击次数:319 发布时间:2017-12-06

为什么有些细胞实验无法重复?
为什么有的细胞在相当长的时间里,都养不到zui佳状态?
为什么实验室中,超过一株以上的细胞都时好时坏?
细胞生长缓慢、细胞变形、碎片增加、悬浮细胞容易成团、培养基提前变色、镜下发现有小黑点……
 
如果排除了其他试剂选择不当、细胞株老化、细菌污染等原因,而仍有上述一种或几种情况,则高度提示——你的细胞可能被支原体污染了!
 
 
图. 电镜下的支原体
 
支原体污染普遍存在
据美国数据统计,细胞发生支原体污染的几率在 70% 以上。同时,由于支原体直径很小,仅在 180nm~350nm 之间,只有通过电镜才能看到,不易被实验者肉眼发觉,支原体污染逐渐成为一个普遍存在的问题。
支原体污染的危害 
支原体污染是个循序的过程,普通抗生素对其无效。因此,支原体污染有多烦人,相信实验人都领教过了。

 

1、细胞状态不佳,生长速度慢,实验无法推进。
2、细胞内 DNA、RNA 及蛋白表达发生改变,影响实验结果,导致实验数据不准确,时间、经费的浪费。
3、一株污染的细胞成为实验室的污染源,对工作区域以及培养箱和液氮罐造成污染,进而污染其他细胞,导致其他细胞继发性污染,实验受影响,数据无法重复,预期结果出不来。

如何有效把支原体赶出细胞?
对于已耗费很多时间、大量扩增起来的细胞,或经过基因转染、体外刺激等大量工作处理过的细胞,如果发现细胞被支原体污染了,怎么办?由于前期工作量巨大,我们无法丢弃已有细胞。但由于价格原因,又无法使用那些昂贵试剂杀除细胞上的支原体,同时,实验人员还需要清除细胞上的支原体污染,让实验得以往下推进,以zui终获得准确的实验数据。
实验者可选用对支原体特效的抑制剂,通过对细胞的前期处理,中期加药,逐步通过 4 代左右的培养,从而将支原体污染彻底清除,确保试验顺利推进,结果准确。全世界此类试剂众多,威正翔禹生物周围的实验人做过很多尝试,其中效果zui确切且性价比很高的当属德国 Minerva 公司的 ZellShield®祛除剂。


Zell Shield®是一种即用型新型复合抗生素,副作用极低,能有效地祛除细胞培养支原体、细菌、真菌污染。Zell Shield®使用方法简单,直接加入培养基中保护细胞。
它的原理:通过抑制支原体增殖中某种蛋白的合成,达到抑制新的支原体增殖的目的。属复合型的新型抗生素。它广泛适用于细胞培养相关的科研和工业领域。

特点
1、适用范围广
普通细胞培养和原代细胞培养
2、无细胞毒性
目前,Zell Shield®对多种细胞系都无细胞毒性。
3、高效广谱
祛除支原体效果明显,同时对细胞内和细胞外的革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌、病原虫、真菌等污染亦可有效预防。
4、操作简便
可直接加入到预处理的培养基或细胞中进行消毒。
5、稳定性高
在细胞孵育期内,Zell Shield®始终保持稳定的活性。
6、低耐药风险
精心挑选的新型复合抗生素只有极低的耐药风险,多种抗生素联合使用几乎不会产生耐药突变株。

操作步骤:
 

*步:研究发现,98% 的支原体污染发生在细胞间隙。因此,首先要把细胞消化下来,放入离心管,悬浮冲洗,离心,弃上清,反复三次。此时可将细胞上大部分的支原体去除,为进一步加药抑制做好准备。
第二步:培养液中加入 1% 的 ZellShield®,细胞进行正常培养。新的支原体增殖受到抑制,旧的支原体随着细胞的换液逐步减少,通过 4 代左右的培养,细胞中的支原体基本可被彻底清除。
注:使用 ZellShield®时,不需使用链青霉素。
此试剂价格约 2200 元/50 ml,可保证大量细胞的实验得以顺利推进。
总之,细胞培养中,支原体污染发生频繁。有时带来的危害会造成实验的巨大损失。应经常检测和及时排除支原体污染,让细胞在健康安全的环境下生长,为获得准确的实验结果,打下良好的基础。
附:关于德国 Minerva 公司
 


Minerva Biolabs GmbH 公司是世界著名的微生物污染控制公司,特别是支原体和军团菌的技术和产品,在世界上遥遥ling先。公司总部设立于德国柏林,专注微生物污染检测与清除产品的研发和销售。
威正翔禹生物 (Vian-saga), 是德国 Minerva 公司十年来在中国的独家合作伙伴,一直被国内生物界誉为「值得持续信赖的优秀供货商」。为国内众多科研机构、生物药厂提供高效的支原体污染祛除保障,同时,更以优质、可靠的原装进口血清,为国内细胞培养实验室提供坚实有力的试剂支持。

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