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支原体PCR检测实验操作样品的收集
点击次数:207 发布时间:2017-11-17
  支原体PCR检测实验操作样品的收集
  
  支原体PCR检测实验操作
  
  PCR反应的前期操作应在无菌环境中进行。
  
  (1)样品的收集:待测细胞用无双抗培养基培养7d,用无菌容器取上清液500ul,4℃保存待测。
  
  (2)模板的制作:在无菌的条件下,取细胞培养上清100ul于一无菌的0.5ml塑料离心管内,盖好盖子,95℃水浴加热5min。
  
  (3)打开盖子,向管内加StrataCleanresin10ul,盖好盖子,旋涡混悬器混合,离心5—10s,吸取上清至一新的塑料离心管中,模板制作完毕,4℃保存。
  
  (4)PCR反应:反应体系zui适条件为:10mmol/lTris-HCL(pH8.38);50mmol/lHCL;1.5-2.5mmol/lMgCL2;200umol/ldNTP;2UDapDNA聚合酶。总反应体系为50ul,反应用去离子水均需用12000uw/cm2紫外灯照射。
  
  VenorGeM支原体污染检测试剂盒(一步法)支原体PCR检测试剂盒组成:
  
  Mix干粉(引物、dNTP、热启动taq酶,内控对照),重悬缓冲液,阳性对照DNA,Tris/EDTA缓冲液。
  
  特点:
  
  广谱(包含常规26种支原体)
  
  灵敏度高
  
  特异性好
  
  操作简单
  
  便捷(整个操作不到3小时)
  
  
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